萬類生物2020年試劑促銷:試劑盒8折優惠,支原體pcr檢測試劑盒-20t 原價980元,現價784元。
詳情請致電咨詢:400-602-0407(轉1號鍵)或登錄公司官網www.wanleibio.cn
產品名稱
:支原體pcr檢測試劑盒
產品概述
:pcr mycoplasma test kit 應用聚合酶鏈式反應技術(pcr)對支原體16s-rrna基因保守區域的特異性片段進行擴增檢測。該方法可以在數小時內得到結果,與傳統的選擇性培養基培養檢測方法相比較,本方法更快速,靈敏度和特異性更高,不會出現由于培養法檢測時大量培養支原體而可能帶來的次級污染的問題。
保存日期
:本試劑盒自訂購之日起一年內有效。
注意事項:
1. 使用本試劑前請仔細閱讀本說明書全文。
2. 操作時應盡量少說話,因口腔中也含有支原體,可能引起樣品污染,而造成假陽性;整個檢測過程中,反應體系的配制、樣本處理及加樣、pcr擴增應分區域進行,以避免交叉污染。
3. 實驗時,試劑盒組分中的試劑使用前應充分融化并混勻(混勻時禁止激烈振蕩,只需要進行上下倒置多次進行混勻)。
4. 反應管中加好所有的試劑后,應盡快上pcr儀進行擴增,以免形成過多的二聚體。
5. 細胞培養物中含有青霉素和鏈霉素等抗生物素不會影響本品的檢測結果。如果用戶需要進一步提高檢測靈敏度,建議細胞在不含青霉素和鏈霉鏈等抗生素中進行培養2-3天后送樣檢測。
操作流程:
[注]: 當細胞生長至80-90%時可以取樣進行檢測,培養液中的青霉素和鏈霉素不會影響檢測效果。
1. 收取待檢樣品(貼壁細胞:細胞生長至80%左右即可,送檢細胞不能用消化液消化細胞,可以使用細胞刮刀刮取細胞;懸浮細胞:細胞生長至80%左右即可),取150μl(約1~3×105細胞數)至離心管,沸水浴10min 。
2. 將煮沸過的細胞懸浮液12000rpm離心2-5min。
3. 取上清4μl作為pcr反應模板。
4. 充分融化pcr反應液,按下列表格配制反應混合液,并以21μl/管分裝至pcr反應管中。 試 劑 | 1 個反應體系 | 5 個反應體系 | 20 個反應體系 |
pcr反應液(μl) | 20 | 100 | 400 |
taq酶(μl) | 1 | 5 | 20 |
5. 每個pcr反應管中加入處理好的樣品4μl,dna陽性對照和陰性對照各加入4μl/管。
6. 將所有pcr反應管放入pcr儀,參照以下參數運行pcr儀。
預變性 94℃ for 5min
循環 94℃ for 30sec
56℃ for 30sec 30cycles
72℃ for 45sec
延伸 72℃ for 5min
7. 取10μl pcr擴增產物,在1%瓊脂糖凝膠上直接點樣(注:無需再加溴酚藍,擴增產物已包含溴酚藍),120v電泳20分鐘(可根據電泳儀的情況,適當調整參數)。
8. eb染色觀察。
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